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  • 剛果紅染色法的原理及使用說明

    2025-10-16 剛果紅染色法特指用剛果紅將纖維素染色的方法。剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物,常用的剛果紅染色法有兩種。在剛果紅中加入氯化鈉可以可以使結(jié)合不牢的剛果紅洗去。剛果紅的原理:剛果紅篩選主要是根據(jù)菌落降解纖維素,可以形成降解圈,氯化鈉沖洗再烘干后可以讓降解圈看的更清楚,更易觀察、它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復合物,但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應.在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅染色后,再Nacl用漂洗,Nacl可以使結(jié)合不牢的剛果紅洗去,這樣就留下大...
  • DAB染色液的使用方法及注意事項

    2025-10-16 DAB染色液用于免疫組化染色,應用在Dako自動染色系統(tǒng)上。DAB染色液的使用方法1.DAB顯色液配制10mMTris-HCl(pH7.6)9mL+DAB(diaminobezidin3,3-二氨基聯(lián)苯胺)+0.3%(W/V)NiCl2或CoCl21mL,顯色時加入5-10mL30%H2O2混勻后立即使用2.顯色準備好含有待測蛋白的固相膜:包括電泳、轉(zhuǎn)印、封阻、一抗(或生物素)處理、辣根過氧化酶(HRP)標記的二抗(或鏈霉親和素)處理、清洗等步驟。3.加入適量的DAB顯色液,...
  • 病理染色——各種組織切片方法如何選擇

    2025-10-16 組織學被定義為對細胞和組織的微觀結(jié)構(gòu)(顯微解剖學)的科學研究,其重要組成就是組織的制片和染色觀察。隨著顯微鏡技術和免疫實驗等的發(fā)展,組織制片切片技術也得到了廣泛的應用,自常用的石蠟切片、冰凍切片中演化出了碳蠟切片、塑封切片、振動切片和超薄切片等等適用于不同實驗需求的制片方式。今天,小編就來帶大家一起了解一下這些切片方式和它們的應用方向。石蠟切片碳蠟切片塑封切片超薄切片石蠟PEGHMMA、GMA環(huán)氧樹脂3-8um3-8um0.5-2um50-80nm組織結(jié)構(gòu)保存良好,能切連續(xù)薄...
  • 干貨分享—病理切片技術選擇與應用指南

    2025-10-16 病理切片技術全攻略:如何精準選擇石蠟、冰凍、速凍、塑封切片?在科研領域,組織切片技術是揭示生命微觀奧秘的核心工具。無論是基因表達定位、蛋白質(zhì)互作研究,還是超微結(jié)構(gòu)解析,切片質(zhì)量直接影響實驗數(shù)據(jù)的可靠性。然而,面對石蠟切片、冰凍切片、速凍切片、塑封切片等多種技術,科研工作者常陷入選擇困境。本文從科研需求出發(fā),解析四大切片技術的原理、適用場景及操作要點,助你輕松匹配實驗目標!一、技術原理與科研場景解析?石蠟切片:形態(tài)學研究的基石技術原理:組織經(jīng)甲醛固定后,梯度脫水、透明化,石蠟包...
  • 關于菌株

    2025-10-13 1、問:斜面低溫保藏法答:將待保藏的菌種接種在合適的斜面培養(yǎng)基上,在相應的條件下培養(yǎng)至得到充足的菌體或者孢子,隨后密封試管置于4攝氏度左右保存,具體保存溫度按照保存菌種設定.保藏時間依微生物的種類從1個月到4個月不等.此法適用范圍廣(細菌、霉菌、放線菌、酵母均適用),操作簡便,成本低廉,復蘇方便,人員能隨時對微生物的狀態(tài)進行觀察.缺點是保藏時間較短,需要經(jīng)常傳代處理,因連續(xù)傳代而容易引入基因突變或者雜菌,培養(yǎng)基的理化性質(zhì)及微生物代謝產(chǎn)物等原因還會導致微生物性狀發(fā)生改變.因此斜...
  • 關于PCR,你知道多少?(四) ----幾種特殊的PCR

    2025-10-13 1、錨定PCR(anchoredPCR)通常采用的PCR反應必須知道欲擴增的DNA或RNA片段兩側(cè)的序列,而在大多數(shù)情況下對某些序列本身或其旁側(cè)序列并不清楚,“錨定PCR”可以幫助克服序列未知或序列未知帶來的障礙?;咀龇ㄊ牵悍蛛x細胞總RNA或者mRNA,在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成cDNA,通過DNA末端轉(zhuǎn)移酶在cDNA3’末端加上poly(dG)尾巴。與此poly(dG)相對應的錨定引物poly(dC)為保證擴增特異性,建議此段旁聚(dC)在十二聚以上,5’端可帶上某些限制酶序...
  • 關于PCR,你知道多少?(三)----Taq DNA聚合酶

    2025-10-13 ----TaqDNA聚合酶在PCR反應中,毫無疑問的DNA聚合酶是最關鍵的因素。PCR最初使用的DNA聚合酶是大腸桿菌DNA聚合酶I的Klenow片段。但該酶存在很多缺陷,使之不能廣為應用,比如:熱穩(wěn)定性差,每次DNA熱變性后大部分酶都被滅活,需要重新加入,每個循環(huán)都要重新加入;Klenow酶反應溫度較低,引物和模板容易形成非特異性配對,產(chǎn)生非特異性擴增。后來人們曾使用過T4DNA聚合酶和T7DNA聚合酶,兩者雖使擴增特異性增加,且使DNA合成速度提高了,但是由于其對熱的穩(wěn)定...
  • 關于PCR,你知道多少?(二)

    2025-10-13 ----PCR反應引物設計PCR反應中引物起著很重要的作用。模板的不同、欲擴增的片段不同、需要的片段長度不同或者是用途不同等等,對引物的要求是不一樣的。PCR作為一種體外酶促反應,其效率和特異性主要取決于兩個方面,一是引物和模板結(jié)合的特異性,二是多聚酶對引物的有效延伸。引物設計的總原則就是提高擴增的效率和特異性。引物設計的原則一般遵循下列幾項:1、引物的長度以15~30bp為宜。引物過短會使特異性降低,過長則成本增加,而且也會降低特異性。常用的是18-27bp,但不應大于38...
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