如何選擇合適的重組蛋白

選擇合適的重組蛋白產(chǎn)品，對(duì)你得到正確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果關(guān)重要，可從以下幾點(diǎn)進(jìn)行選擇：

1、蛋白來(lái)源

對(duì)于一些蛋白，需要進(jìn)行一系列的翻譯后修飾才能成為具有活性的成熟蛋白。細(xì)菌不能提供這樣的修飾，而哺乳動(dòng)物細(xì)胞可以。因此，選購(gòu)時(shí)應(yīng)注意蛋白的來(lái)源。例如，novaprotein的人IL-4是在E. coli中制備的，金斯瑞的人IL-4是在哺乳動(dòng)物CHO細(xì)胞中制備的。

當(dāng)然除了上面提到的兩種表達(dá)系統(tǒng)外，還有酵母和昆蟲表達(dá)系統(tǒng)，四種系統(tǒng)各有優(yōu)劣，選重組蛋白是一定要注意。

2、種屬來(lái)源

蛋白的種屬來(lái)源常見(jiàn)的有人源、小鼠源和大鼠源等。一般來(lái)說(shuō)，不同種屬之間的蛋白同源性在80%以上就可視為有交叉活性，可推薦使用。

3、生物活性和穩(wěn)定性

蛋白的純度、內(nèi)毒素水平和批次間穩(wěn)定性等直接會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，因此，高品質(zhì)的蛋白產(chǎn)品會(huì)嚴(yán)格監(jiān)控這一環(huán)節(jié)，并且提供詳細(xì)數(shù)據(jù)。同時(shí)，在選擇蛋白產(chǎn)品時(shí)還需考慮其生物活性。

一般記得以下五點(diǎn)就行：

· 大多數(shù)人類細(xì)胞因子對(duì)小鼠細(xì)胞都有活性。

· 許多小鼠細(xì)胞因子對(duì)人類細(xì)胞也有活性，但比相應(yīng)人類細(xì)胞因子活性低。

· 一些人類的細(xì)胞因子（如IL-7）在小鼠細(xì)胞中表現(xiàn)出比小鼠細(xì)胞因子更高的活性。

· 干擾素、GM-CSF、IL-3 和IL-4 有物種特異性，對(duì)于非人類細(xì)胞幾乎沒(méi)有活性。

· 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子是高度保守的，在其它的動(dòng)物細(xì)胞中也能表現(xiàn)很好的活性。

4、蛋白形式

通常有兩種形式：含牛血清白蛋白BSA或不含BSA，不含BSA一般用“CF"表示。加入BSA可以提高蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性，增加了貯存期限。含BSA的蛋白可以作為細(xì)胞組織培養(yǎng)物或者ELISA實(shí)驗(yàn)中的理想標(biāo)準(zhǔn)品，而CF形式的蛋白尤其適用于活體實(shí)驗(yàn)。以R&D systems的Human IL?4為例，就有兩種形式，買之前要先明確自己用來(lái)做什么實(shí)驗(yàn)的。

5、查閱文獻(xiàn)

這個(gè)是快捷的方法，怎么去查文獻(xiàn)是我們必須要掌握的技能。

雖有萬(wàn)般方法，但是只要你會(huì)查閱文獻(xiàn)，則萬(wàn)事皆定。

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